elepo

KOマウスの作製

indelによるKO: 一種類のgRNAによりindelを引き起こします。どのようにindelが起こるかコントロールすることができませんのでシークエンスにより確認を行う必要があります。

変異をデザイン: シークエンスによる選別は大変です。そこでssODNにより制限酵素サイトや終始コドンを挿入することで変異をデザインすることができます(下記のpoint mutationを同じです)(Ref.1)。これによりF0マウスの選別やgenotypingが簡単になります。

References

1. Sci Rep. 2014 Jun 23;4:5396. doi: 10.1038/srep05396. Rapid generation of mouse models with defined point mutations by the CRISPR/Cas9 system. Inui M, Miyado M, Igarashi M, Tamano M, Kubo A, Yamashita S, Asahara H, Fukami M, Takada S.

2. Genesis. 2016 Feb;54(2):78-85. doi: 10.1002/dvg.22915. Epub 2016 Jan 25. Chromosome engineering in zygotes with CRISPR/Cas9.Boroviak K, Doe B, Banerjee R, Yang F, Bradley A.