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Microinjection
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申し込み後、同意書とCDB WebのIDとパスワードを送付致します。
• メールの返信機能を使ってのご連絡は、記録が残らないことになりますのでお気を付け下さい。
• 初期設定では共同開発責任者および担当者のメールアドレスにお送りする設定になっておりますが他にご希望の方がおられましたら追加でメールアドレスを登録する事が可能です。必要な場合は、登録したいメールアドレスをご教示下さい。
トランスジーンのマップを提出して下さい。こちらをご参照ください(PDF)。
トランスジーン調製方法
＜ Standard-sized DNA(～10kb程度)の場合 ＞
• 詳細はプロトコールを参照してください (PDF)。
• 制限酵素処理：直鎖状DNAとし、ベクター配列部分をできるだけ除いて下さい。
• ゲルからの精製：アガルースゲルなどの不純物を除いて下さい。
• 濃度と量：50ng/μl inTEを30～50μl。可能であればロットの異なるものを用意して下さい。
• 受取ったトランスジーンは、当方で1～5ng/μlになるようにPBS(-)(pH7.4) で希釈後、インジェクションに使用します。
• よくある質問もご参照下さい(PDF)。
＜ BAC DNAの場合 ＞
• DNAの形状は環状でも線状でも構いません。
濃度と量：50ng/μl inTEを30～50μl。可能であればロットの異なるものを用意して下さい。
• 詳細はプロトコールを参照してください(PDF)。
• 精製法やModificationに関しては下記の文献をご参照下さい。
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References
1. Yang XW, Model P, Heintz N.
2. Homologous recombination based modification in Esherichia coli and germline transmission in transgenic mice of a bacterial artificial chromsome
3. Nature biotechnology 15 859-865 (1997)
4. Gong S, Zheng C, Doughty ML, Losos K, Didkovsky N, Schambra UB, Nowak NJ,Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N.
5. A gene expression atlas of the central nervous system based on bacterial artificial chromosomes
6. Nature. 425 917-925. (2003)
7. Gong S, Yang XW, Li C, Heintz N.
8. Highly Efficient Modification of Bacterial Artificial Chromosomes (BACs) Using Novel Shuttle Vectors Containing the R6Kgamma Origin of Replication
9. Genome Research 12 1992-1998 (2002)
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送付方法
冷蔵にして下記に送付してください。
＜送付するもの＞
• トランスジーン：トランスジーン名、濃度、調製日を明記すること。
• 濃度調整後の電気泳動写真、およびOD260/280、OD260/230値を記入したもの。
＜送付先＞
〒650-0047 神戸市中央区港島南町２－２－３
RIKEN BDR
生体モデル開発チーム Tg担当者 宛
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